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普鲁卡因青霉素的药典援用

  无菌 取该品,加0.1%卵白胨水溶液适量使消融,转移至500ml的0.1%卵白胨水溶液中,摇匀,制成混悬液,用薄膜过滤法处置,冲刷液用量不少于800ml,分次冲刷后,在硫乙醇酸盐流体培育基中插手青霉素酶(大于100万单元/100mL),依法查抄(《中国药典》2005年版二部附录Ⅺ H),应合适划定。

  【性状】 比旋度 取该品,细密称定,加水:丙酮(2:3)夹杂液消融并定量稀释制成每1ml中约含10mg的溶液,依法测定(附录Ⅵ E),比旋度为+165°至+180°

  【辨别】(3) ①取该品,加丙酮-水(4:6)制成每1ml中含5mg的溶液,作为供试品溶液;另取盐酸普鲁卡因对照品,加丙酮-水(4:6)制成每1ml中含2mg的溶液,作为对照品溶液(1),取青霉素对照品,加丙酮-水(4:6)制成每1ml中含3mg的溶液,秒速时时彩计划网页作为对照品溶液(2).照薄层色谱法(附录V B)试验,吸收上述三种溶液各5μl,别离点于统一硅胶G薄层板上,杂质对照品以丙酮-154g/L醋酸铵(4:6),并用氨水或醋酸调理pH值至7为展开剂,展开,晾干,置碘蒸汽中显色,供试品溶液所显两主黑点的颜色与位置应别离与响应对照品的主黑点的颜色与位置不异。

  ②取该品2mg,置试管中,先加水0.05ml润湿,再插手硫酸-甲醛(1:1)2ml,扭转试管使混匀,溶液几乎不显色,置水浴上加热1分钟,渐显红棕色。

  ③取该品0.1g,加稀盐酸2ml消融,溶液显芬芳第一胺类的辨别反映(附录Ⅲ)。

  【查抄】 相关物质 取该品70mg,细密称定,置50ml量瓶中,用流动相A消融并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;取对氨基苯甲酸对照品16.80mg,置50ml量瓶中,用流动相A消融并稀释至刻度,摇匀,细密量取5ml,置50ml量瓶中,用流动相A消融并稀释至刻度,摇匀,作为对氨基苯甲酸储蓄液;别离细密量取供试品溶液1ml、对氨基苯甲酸储蓄液1ml,置统一100ml量瓶中,用流动相A消融并稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。照液相色谱法(附录V D)测定,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相A为缓冲液(取磷酸二氢钾14g和40%氢氧化四丁基铵溶液6.5g 消融于约 700ml水中,用1mol/L氢氧化钾溶液调理pH至7.0,用水稀释至1000ml,混匀)-水-乙腈(52:28:20);流速为每分钟1.0ml。检测波长为225nm。先以流动相A等度洗脱,待普鲁卡因峰洗脱完毕后当即按下表进行线性梯度洗脱。别离取青霉素、盐酸普鲁卡因和青霉素钠夹杂杂质对照品适量,用对氨基苯甲酸储蓄液消融并制成每1ml平分别含0.50mg、0.15mg和0.80mg的夹杂溶液,取10μl注入液相色谱仪,记实色谱图,青霉素峰应在25分钟内出峰,理论板数按普鲁卡因峰和青霉素峰计较均应大于1500,除两个主峰和对氨基苯甲酸外,应检出一个较大的青霉素主杂质,对氨基苯甲酸与相邻杂质峰、普鲁卡因与青霉素主杂质峰、青霉素与相邻杂质峰之间的分手度均应大于1.5。取对照溶液10μl注入液相色谱仪,调理检测活络度,使青霉素主峰的峰高为满量程的15%~20%。再细密量取供试品溶液和对照溶液各10μl,别离注入液相色谱仪,记实色谱图,供试品溶液的色谱图中若有杂质峰,对氨基苯甲酸峰面积不得大于对照溶液对应峰的峰面积(0.024%),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液青霉素主峰面积(1.0%)。 时间(分钟) 流动相(A%) 流动相B(%) 0 100 0 1 100 0 2 50 50 27 50 50 28 100 0 38 100 0 青霉素聚合物 照分子排阻色谱法(附录V H)测定。

  色谱前提与系统合用性试验 用葡聚糖凝胶G-10(40~120μm)为填充剂,玻璃柱内径1.3~1.6cm,柱高度30~40cm。以pH7.0的0.03mol/L磷酸盐缓冲液0.03mol/L磷酸氢二钠溶液-0.03mol/L磷酸二氢钠溶液(61:39)为流动相A,以水为流动相B,流速为1.5mL/min,检测波长为254nm。别离以流动相A、B为流动相,取0.1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液200μl,注入高分子仪,理论板数以蓝色葡聚糖2000峰计较均应不低于500,拖尾因子均应小于2.0。在两种流动相系统中蓝色葡聚糖2000峰保留时间的比值应在0.93~1.07之间,对照溶液主峰和供试品溶液中聚合物峰与响应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值均应在0.93~1.07之间。另以流动相B为流动相,细密量取对照溶液200μl,持续进样5次,峰面积的相对尺度误差应不大于5.0%。再称取样品0.3g,置10mL容量瓶中,先插手N,N-二甲氨基甲酰胺约2ml使样品完全消融,再加0.1mol/L蓝色葡聚糖2000溶液稀释至刻度,摇匀,当即进样,计较蓝色葡聚糖2000和聚合物的夹杂峰与主峰的分手度R应大于2.0。

  对照溶液的制备 取青霉素对照品适量,细密称定,加水消融并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液。

  测定法 取该品约0.3g,细密称定,置10ml量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺2ml使消融,用水稀释至刻度,摇匀,当即细密量取200μl注入色谱仪,以流动相A为流动相进行测定,记实色谱图。另细密量取对照溶液200μl注入色谱仪,以流动相B为流动相,同法测定。按外标法以峰面积计较,含青霉素聚合物以青霉素计,不得过青霉素的0.20%。

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